کاربردهای تست اوره آز در شناسایی سویه های باکتریایی
تست اوره آز و شناسایی باکتری های به چه صورتی است؟
برخی باکتری های آنزیمی به نام اوره آز (urease) تولید می کنند که قادر است ترکیبات آمیدی نظیر اوره را تجزیه نموده و آن را به آمونیاک، دی اکسید کربن و آب تبدیل کند.
در خانواده انتروباکتریاسه از میان باکتری های لاکتوز منفی تعدادی از آنها از جمله پروتئوس، پروویدنسیا و مورگانلا به دلیل فعالیت اوره آز(Urease Activity) از باکتری های دیگر این گروه نظیر سالمونلا و شیگلا قابل افتراق هستند. شایان ذکر است پروتئوس میرابیلیس یکی از عوامل مهم عفونت ادراری در انسان می باشد. همچنین تست اوره آز جهت شناسایی گونه های مهمی نظیر کورینه باکتریوم اوره آلیتیکوم، هلیکوباکترپیلوری، تشخیص مخمر های کپسول دار و به عنوان یک تست اضافی برای تشخیص بعضی کوکوباسیل های گرم منفی به کار می رود.
شایان ذکر است پروتئوس میرابیلیس یکی از عوامل مهم عفونت ادراری در انسان می باشد. همچنین تست اوره آز جهت شناسایی گونه های مهمی نظیر کورینه باکتریوم اوره آلیتیکوم، هلیکوباکتر پیلوری، تشخیص مخمر های کپسول دار و به عنوان یک تست اضافی برای تشخیص بعضی کوکوباسیل های گرم منفی به کار می رود.
فعالیت اوره آز باکتری ها را می توان با کشت باکتری در محیط حاوی اوره و با کمک معرف فنل رد بررسی نمود. به دنبال هیدرولیز اوره و تجمع آمونیاک PH محیط قلیایی می شود. بالا رفتن PH موجب تغییر رنگ معرف از قرمز پرتقالی به صورتی پررنگ یا قرمز ارغوانی می شود. عدم مشاهده رنگ صورتی پررنگ یا ارغوانی نشانه منفی شدن تست اوره آز است.
پروتکل/روش انجام آزمایش اوره آز
برای انجام این تست Urea Broth استفاده می شود. باکتری مورد آزمایش در شرایط استریل به محیط کشت مایع تلقیح شده و به مدت 24 تا 48 ساعت در دمای 35 درجه سانتیگراد نگهداری می شود. سپس لوله های کشت از نظر هیدرولیز اوره مورد بررسی قرار می گیرند.
نکات مهم در حین انجام آزمایش
تعدادی از باکتری اوره را با تاٴخیر هیدرولیز می کنند و برای بررسی واکنش تاٴخیری این باکتری ها، دوره انکوباسیون بیش از 48 ساعت مورد نیاز است.
برای یادگیری تست اوره آز و سایر تکنیک های مورد نیاز برای آزمایشگاه میکروبیولوژی
از طریق لینک دوره های آموزشی تخصصی آزمایشگاه می توانید اقدام نمایید.
تست اوره آز سریع(RUT):
هلیکوباکتر پیلوری یکی از عوامل عمده خطر زخم های معده و در پی آن سرطان معده است. روش های مختلفی برای تشخیص هلیکوباکتر وجود دارد اما یکی از روش های بسیار سریع و دقیق تست تشخیصی مولکولی به نام تست اوره آز می باشد.
در این آزمایش نمونه برداری از مخاط معده یا از مدفوع (روش مناسب تر) انجام می پذیرد که در نتیجه این تست در صورت وجود هلیکوباکتر پیلوری اوره آز ترشح شده از آن اوره به آمونیاک و دی اکسید کرین هیدرولیز می شود و در حضور اندیکاتور فنل رد به رنگ قرمز نیز در می آید.
تست آنتی ژن هیلیکوباکتر پیلوری در مدفوع
روش های متعددی برای تشخیص عفونت های مربوط به هیلیکوباکتر پیلوری وجود دارد. روش های کشت در شرایط استریل، تست تنفس اوره (UBT)، آزمون های هیستولوژیک یا تست اوره آز مستقیم نمونه های بیوپسی بدست آمده در گاسترودئودنوسکپی از جمله روش های مورد استفاده مهم برای تشخیص هلیکوباکتر می باشند.
نتایج مثبت نشانگر وجود آنتی ژن هلیکوباکتر در مدفوع می باشد و نتایج منفی نشان دهنده عدم شناسایی آنتی ژن هلیکوباکتر پیلوری در مدفوع است که البته احتمال عفونت به این باکتری را رد نمی کند.
آزمایش CLO همان تست اوره آز مستقیم از نمونه بیوپسی است.
بیشتر بخوانبد :
