• آخرین
  • روند
  • همه
تست آنتی بیوگرام

تست آنتی بیوگرام | دیسک دیفیوژن

دی 15, 1401
توالی یابی به روش نیمه رسانا

توالی یابی به روش نیمه رسانا (Ion torrent)

فروردین 25, 1402
استخراج DNA

مروری بر انواع روشهای استخراج DNA

فروردین 5, 1402
توالی یابی SOLiD

توالی یابی SOLiD

اسفند 18, 1401
پایروسیکوئنسینگ

توالی یابی به روش پایروسیکوئنسینگ(Pyrosequencing)

بهمن 18, 1401
توالی یابی سنگر

توالی یابی سنگر (sanger) | نسل اول تعیین توالی DNA

بهمن 16, 1401
توالی یابی ماکسام گیلبرت

توالی یابی ماکسام گیلبرت | روش تجزیه شیمیایی یا شکست زنجیر

بهمن 1, 1401
انواع سندرم های ژنتیکی

بررسی انواع سندرم های ژنتیکی

اردیبهشت 9, 1402
تکنیک کریسپر

تکنیک کریسپر

فروردین 25, 1402
رومانوف

پیدا کردن اعضای خاندان رومانوف با بررسی STR های استخوان های خانواده سلطنتی

خرداد 9, 1402
استخراج DNA با پروتئیناز K

استخراج DNA با پروتئیناز K

فروردین 5, 1402
طراحی پرایمر

راهنمای جامع طراحی پرایمر

فروردین 25, 1402
تکنیک SDS-PAGE

تکنیک SDS-PAGE

اردیبهشت 15, 1401
روز جهانی DNA

روز جهانی DNA

اردیبهشت 5, 1401
استخراج DNA به روش Salting Out

استخراج DNA به روش Salting Out

فروردین 5, 1402
روز علوم آزمایشگاهی

روز علوم آزمایشگاهی؛ زاد روز حکیم اسماعیل جرجانی

فروردین 29, 1401
روز جهانی هموفیلی

روز جهانی هموفیلی

فروردین 27, 1401
  • وبسایت داروینو
  • درباره ما
  • تماس با ما
یکشنبه, خرداد 14, 1402
  • ورود
  • ثبت نام
لوگوی وبلاگ داروینو
  • صفحه اصلی
  • بلاگ
    • همه
    • بیوانفورماتیک
    • بیوتکنولوژی
    • پزشکی و داروسازی
    • ژنتیک
    • علوم آزمایشگاهی
    • کشت سلول و بافت‌شناسی
    • میکروبیولوژی
    توالی یابی به روش نیمه رسانا

    توالی یابی به روش نیمه رسانا (Ion torrent)

    استخراج DNA

    مروری بر انواع روشهای استخراج DNA

    توالی یابی SOLiD

    توالی یابی SOLiD

    پایروسیکوئنسینگ

    توالی یابی به روش پایروسیکوئنسینگ(Pyrosequencing)

    توالی یابی سنگر

    توالی یابی سنگر (sanger) | نسل اول تعیین توالی DNA

    توالی یابی ماکسام گیلبرت

    توالی یابی ماکسام گیلبرت | روش تجزیه شیمیایی یا شکست زنجیر

    انواع سندرم های ژنتیکی

    بررسی انواع سندرم های ژنتیکی

    تکنیک کریسپر

    تکنیک کریسپر

    رومانوف

    پیدا کردن اعضای خاندان رومانوف با بررسی STR های استخوان های خانواده سلطنتی

    استخراج DNA با پروتئیناز K

    استخراج DNA با پروتئیناز K

    برچسب های پرطرفدار

    • داروینو پلاس
      • همه
      • بوم‌گردی
      • خبرهای علمی و پزشکی
      • معرفی دستگاه ها و تجهیزات آزمایشگاهی
      • معرفی سایت و نرم افزار
      • معرفی شخصیت و آزمایشگاه
      • معرفی شرکت های معتبر
      • معرفی فیلم و کتاب
      • مناسبت‌ها
      روز جهانی DNA

      روز جهانی DNA

      روز علوم آزمایشگاهی

      روز علوم آزمایشگاهی؛ زاد روز حکیم اسماعیل جرجانی

      روز جهانی هموفیلی

      روز جهانی هموفیلی

      دست نوشته های سرقت شده داروین

      بازگشت دست نوشته های سرقت شده داروین به کمبریج پس از 22 سال

      ذخایر ژنتیکی و زیستی

      ذخایر ژنتیکی و زیستی، گنجینه ی ملی ایران

      ژل داک

      دستگاه ژل داک یا مستندساز ژل و انواع آن

      نرم افزار Oligo 7

      َآنالیز و طراحی پرایمر با نرم افزار Oligo 7

      پیوند قلب خوک به انسان

      پیوند قلب خوک به انسان با استفاده از تکنیک کریسپر

      سانتریفوژ

      انواع سانتریفوژها و کاربرد آنها

      طراحی پرایمر با نرم افزار gene runner

      طراحی پرایمر با نرم افزار gene runner

      برچسب های پرطرفدار

      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      وبلاگ داروینو
      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      صفحه نخست بلاگ میکروبیولوژی

      تست آنتی بیوگرام | دیسک دیفیوژن

      توسط مدیر سایت
      دی 15, 1401
      در بلاگ, علوم آزمایشگاهی, میکروبیولوژی
      1 0
      0
      تست آنتی بیوگرام

      • کاربرد تست آنتی بیوگرام و دیگر تست های حساسیت دارویی باکتری ها
          • روش انتشار دیسک در آگار یا تست دیسک دیفیوژن(Disk diffusion)
          • ذخيره سازي و نگهداري ديسك هاي آنتي بيوتيكي:
          • روش Etest:
          • پروتکل/روش انجام تست آنتی بیوگرام
          • نکات مهم در حین انجام آزمایش/تست آنتی بیوگرام

      کاربرد تست آنتی بیوگرام و دیگر تست های حساسیت دارویی باکتری ها

      آنتی بیوتیک ها مواد شیمیایی هستند که بصورت سنتتیک یا طبیعی از قارچ ها و باکتری ها استخراج می شوند. طیف فعالیت ضد میکروبی داروهای مختلف، متفاوت است. بعضی از آنها دامنه فعالیت بسیار محدودی داشته و تنها بر روی یک گروه از میکروارگانیسم ها موثر می باشند. برخی دیگر بطور وسیع الطیف بر روی بسیاری از میکروارگانیسم ها تاثیر دارند.

      این سوال در ذهن ایجاد می شود که ما از کجا بدانیم کدام آنتی بیوتیک بر روی چه باکتری هایی موثر است؟ جواب سوال ما تست آنتی بیوگرام است که بصورت روتین در آزمایشگاه های تشخیصی انجام می گیرد. در واقع می توان اذعان داشت که در عفونت های میکروبی، آزمایشگاه دارو را تجویز می کند نه پزشک! اما چگونه؟ در این مقاله قصد داریم هر آنچه در مورد تست آنتی بیوگرام اهمیت دارد را بررسی نماییم

      به منظور ارزیابی یک داروی مناسب باید در مورد نحوه تاثیر دارو، اثرات جانبی احتمالی آن در میزبان و طیف فعالیت ضد میکروبی دارو اطلاعات درستی داشت. مکانیسم اثر داروهای مختلف با یکدیگر متفاوت است. آنتی بیوتیک ها تاثیر دوگانه ای بر باکتری ها دارند، بطوریکه در غلظت های پایین رشد باکتری را بصورت برگشت پذیر مهار می کنند و در غلظت های بالا موجب مرگ باکتری می شوند. بنابراین برای افتراق این دو اثر از دو اصطلاح MIC و MBC استفاده می شود.

      اصطلاح MIC:مخفف عبارت Minimum Inhibitory Concentration بوده و بیانگر حداقل غلظتی از یک آنتی بیوتیک است که می تواند باکتری استاتیک باشد یا رشد باکتری را متوقف نماید.

      اصطلاح MBC: همان Minimum Bactericidal Concentration می باشد و به معنای حداقل غلظتی از دارو است که موجب مرگ باکتری می شود یا خاصیت باکتریوساید داشته باشد.

      تست MIC

      در انجام تست آنتی بیوگرام  4 نکته مهم باید مد نظر قرار بگیرد که عبارتند از مشخص نمودن ارگانیسمی که باید آزمایش روی آن انجام شود، روش مورد استفاده، دیسک های مربوط به آنتی بیوتیک های مورد استفاده و چگونگی گزارش نتایج حاصل از انجام تست آنتی بیوگرام.

      حساسیت دارویی اکثر باکتری های بیماری زا شناخته شده است ولی بعضی اوقات لازم است تا به کمک آزمون تعیین حساسیت دارویی بهترین دارو از بین انواع گوناگون دارو ها انتخاب شود. برای این منظور روش های مختلفی وجود دارد که عبارتند از:

      • Disk diffusion (Kirby Bauer) – روش کربی بائر (استفاده از دیسک های کاغذی آغشته به آنتی بیوتیک)
      • Broth micro-dilution MIC (NCCLS)
      • E test

      روش انتشار دیسک در آگار یا تست دیسک دیفیوژن(Disk diffusion)

      یکی از روش های روتین و کاربردی در آزمایشگاه می باشد. در این روش دیسک های حاوی آنتی بیوتیک روی محیط کشت جامد قرار می گیرند. این دیسک ها هم اندازه بوده و با غلظت های مشخصی از آنتی بیوتیک آغشته شده اند. محیط کشت مورد استفاده در این تست مولر هینتون آگار نام دارد. آنتی بیوتیک از دیسک به محیط اطراف منتشر شده و مانع از رشد نمونه میکروبی مورد نظر می شود. با اندازه گیری قطر هاله عدم رشد به سادگی می توان حساسیت باکتری را نسبت به آنتی بیوتیک ها تعیین نمود.

      ذخيره سازي و نگهداري ديسك هاي آنتي بيوتيكي:

      ديسك ها بايد در يخچال 8 درجه سانتيگراد و پايين تر، يا در فريزر 20- درجه سانتيگراد و پايين تر تا زمان مصرف نگهداري شوند.
      تمامي ديسك هاي گروه بتالاكتام مانند پني سيلين، آمپي سيلين، كربني سيلين، تيكارسيلين، اگزاسيلين و نسل اول، دوم و سوم سفالوسپورين ها و … بايد در فريزر نگهداري شوند و فقط مي توان مقداري از آن را بر اساس كار روزانه آزمايشگاه حداكثر به مدت يك هفته در يخچال نگهداري نمود.

      بعضي آنتي بيوتيكهاي حساس مثل ايميپنم، سفاكلر و تركيبات كلاولانيك اسيد يا سولباكتام اگر تا هنگام مصرف در فريزر نگهداري شوند، پايداري بيشتري خواهند داشت.
      ديسك ها بايد در ظروف داراي درپوش محكم و حاوي مواد جاذب رطوبت نگهداري شوند.
      ديسك هاي آنتي بيوتيكي بايد يك تا دو ساعت قبل از استفاده از يخچال يا فريزر خارج شوند تا به درجه حرارت اتاق برسند.

      کارآموزی آزمایشگاه

      برای آموزش تست آنتی بیوگرام و سایر تکنیک های مورد نیاز برای آزمایشگاه میکروبیولوژی

      از طریق لینک دوره های آموزشی تخصصی آزمایشگاه می توانید اقدام نمایید

       

       

      در بررسی نتایج تست آنتی بیوگرام اندازه قطر هاله عدم رشد، به عوامل گوناگونی بستگی دارد که عبارتند از؛

      • سرعت انتشار آنتی بیوتیک در محیط کشت
      • غلظت آنتی بیوتیک
      • تعداد باکتری تلقیح شده
      • سرعت رشد باکتری
      • میزان حساسیت باکتری نسبت به آنتی بیوتیک
      • دوره انکوباسیون
      • عمق آگار تهیه شده

       

      روش Etest:

      در این روش باکتری مورد آزمایش به روش خطی در سه جهت بر سطح آگار کشت داده می شود. نوار ها ی پلاستیکی مخصوص Etest بصورت شعاعی برسطح آگار قرار داده می شود. هر نوار بصورت گرادیان غلظت توسط یک آنتی بیوتک آغشته شده است. ابتدای نوار که از غلظت کمتری برخوردار است به سمت مرکز پلیت قرار دارد. پس از کاشت نوار ها، پلیت را به مدت 24 تا 48 ساعت در دمای 35 درجه سانتیگراد نگهداری کرده، سپس هاله بیضوی شکل عدم رشد نمایان می شود.

      روش Etest

       روش Etest

       

      پروتکل/روش انجام تست آنتی بیوگرام

      1. در شرایط استریل توسط سواپ پنبه ای مقداری از کشت میکروبی را در تمام سطح پلیت مغذی تلقیح کنید.
      2. دیسک های آنتی بیوگرام را بوسیله پنس استریل در سطح پلیت قرار داده و با کمی فشار آنها را کاملا بر سطح آگار بچسبانید.
      3. پلیت ها را بصورت وارونه در گرمخانه 35 درجه به مدت 24 ساعت نگهداری کنید.
      4. پس از طی دوره انکوباسیون، بوسیله خط کش، قطر هاله عدم رشد را در اطراف دیسک ها اندازه گیری و ثبت کنید و با توجه به جدول همراه دیسک ها گزارش تست آنتی بیوگرام را برای هر یک از آنتی بیوتیک ها بصورت حساس(sensitive)، مقاوم(resistant) یا نیمه حساس(intermediate) گزارش کنید.
      • توجه داشته باشید که تست آنتی بیوگرام از حساسیت دقیقی برخوردار نیست، زیرا در تست های دقیق باید سوسپانسیون باکتری تهیه شده رقت مشخصی داشته باشد. برای تهیه رقت استاندارد از شاخص مک فارلند استفاده می شود و میزان کدورت سوسپانسیون باکتری را با کدورت 0.5 مک فارلند مقایسه می کنند. در این حالت سوسپانسیون استاندارد شده حاوی 1.5 ⨯108 باکتری می باشد.
      • برای تهیه کدورت 0.5 مک فارلند؛ 0.5 میلی لیتر کلرید باریم 0.48 مولار را در 99.5 میلی لیتر اسید سولفوریک0.36 نرمال مخلوط می کنند. این محیط به مدت 6 ماه در تاریکی و در ظرف درب بسته قابل نگهداری است. اگر در هر زمان رسوبی در لوله مشاهده شود، محیط غیر قابل استفاده خواهد بود.

       

      خرید دیسک آنتی بیوگرام

       

      نکات مهم در حین انجام آزمایش/تست آنتی بیوگرام

      1. برای تلقیح نمونه، ابتدا با سواپ استریل سوسپانسیون میکروبی را مخلوط کرده، سواپ را با قدرت به دیواره لوله تکیه داده و فشار دهید تا آب اضافی آن گرفته شود، سپس آن را به محیط کشت مولر هینتون انتقال داده و تمامی سطح محیط را به روش چمنی تلقیح کنیم.
      2. دیسک های آنتی بیوگرام را نیم ساعت قبل از کاشت، بیرون از یخچال قرار دهید.
      3. قبل از استفاده از محیط کشت آنها را از یخچال خارج می کنیم و به مدت 10 تا 20 دقیقه در انکوباتور 35 درجه قرار دهید تا رطوبت موجود در سطح آگار خشک شود.
      4. دیسک ها را بصورت دایره ای و به فاصله 1.2 سانتیمتر از یکدیگر بکارید.
      5. ضخامت محیط کشت مولر هینتون آگار باید یکنواخت در تمامی پلیت ها 5 میلیمتر باشد.
      6. باید توجه داشت که دیسک های مورد استفاده متناسب با نوع باکتری انتخاب شود. برای مثال: هیچگاه برای باکتری گرم منفی دیسک پنی سیلین استفاده نکنید؛ زیرا نسبت به آن مقاوم است و یا برای کشت ادرار از دیسک کلرامفنیکل استفاده نکنید، برای اینکه این آنتی بیوتیک نمی تواند وارد مجاری ادراری شود.
      7. هنگام خواندن نتیجه دقت کنید که همواره امتداد خط کش از وسط دیسک عبور کند.
      8. همیشه قطر هاله عدم رشد را اندازه گیری کنید.
      9. اگر در اطراف دیسک حتی یک کلنی هم باشد، باید از همانجا تا دیسک را اندازه گیری کرد نه قطر هاله را.
      10. پس از تلقیح باکتری به محیط آنتی بیوگرام، در فاصله حداکثر 15 دقیقه باید دیسک ها در سطح آگار کاشته شوند.
      11. در برخی از باکتری های سخت رشد برای انجام تست آنتی بیوگرام از محیط های کشت اختصاصی استفاده می شود.
      12. جهت تلقیح حتما از ایزوله خالص استفاده شود. اگر نمونه مورد استفاده خالص نباشد، تست کاملا اشتباه خواهد بود.
      13. تا زمانی که دیسک را روی محیط فشار نداده اید، می توانید جای آن را تغییر دهید، اما بعد از فشار دادن دیسک و تثبیت آن به هیچ عنوان دیسک را جا به جا نکنید.
      14. اگر نمونه تلقیح شده بعد از انکوباسیون بصورت یک دست رشد نکرده باشد، نشان دهنده این است که مقدار کلنی برداشت شده کمتر از استاندارد مک فارلند بوده است.
      15. اگر در اطراف تمام دیسک ها هاله تشکیل شود و یا در اطراف هیچ یک از دیسک ها هاله ای تشکیل نشود باید تست تجدید شود.
      16. اگر PH محیط  کشت مولر هینتون آگار مناسب نباشد نتایج اشتباه بدست می آید.
      17. بسیاری از باکتری ها کم کم به آنتی بیوتیک های مختلف مقاوم می شوند، که این می تواند عمر آنتی بیوتیک ها را کم کند.
      18. استفاده زیاد از سولفونامید ها باعث بیماری های عصب شنوایی و یا بیماری ها ی کلیوی خواهد شد.
      19. مصرف زیاد پنی سیلین باعث ترومبوسیتوپنی و مصرف زیاد تتراسایکلین موجب گرانولوسیتوپنی می شود.
      20. دیسک ها باید حداکثر به مدت یک ماه در یخچال و بیش از یک ماه در فریزر نگهداری شوند.
      21. آمینوگلیکوزید ها بر روی باکتری های بی هوازی بی تاثیر هستند.
      22. دیسک ایمیپنم بر روی باکتری های گرم مثبت و گرم منفی تاثیر دارد، ولی باید در عفونتهای شدید استفاده گردد تا مقاومت دارویی ایجاد نشود.
      23. تتراسایکلین آنتی بیوتیک وسیع الطیفی است و معمولا بصورت موضعی استفاده می شود.

       

      بیشتر بخوانید:

      • رنگ آمیزی باکتری ها | آشنایی با 4 روش رنگ آمیزی متداول
      • تست های بیوشیمیایی | 6 تست مهم و کاربردی در آزمایشگاه میکروبیولوژی
      برچسب ها: SOP آزمایشگاهآزمایش Etestآنتی بیوتیکباکتریواستاتیکباکتریوسایدپلتفرم آموزشی و خدماتی آزمایشگاهتست MBCتست MICتست آنتی بیوگرامحساسیت داروییخدمات آزمایشگاه میکروبیولوژیخدمات آزمایشگاهیدیسک دیفیوژنسواپکارآموزی آزمایشگاهکارآموزی میکروبیولوژیکارورزی میکروبیولوژیگزارش کار میکروبیولوژیمقاومت آنتی بیوتیکیمیکروارگانیسممیکروبیولوژی
      پست قبلی

      تکنیک VNTR PCR و انگشت نگاری DNA

      پست بعدی

      تکنیک Long PCR و کاربرد آن در آزمایشگاه ژنتیک

      مدیر سایت

      مدیر سایت

      پست بعدی
      تکنیک Long PCR

      تکنیک Long PCR و کاربرد آن در آزمایشگاه ژنتیک

      دیدگاهتان را بنویسید لغو پاسخ

      نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

      وبلاگ داروینو

      کلیه حقوق برای وبسایت داروینو محفوظ است.

      دسترسی سریع

      • وبسایت داروینو
      • درباره ما
      • تماس با ما

      ما را دنبال کنید

      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      • وبسایت داروینو
      • صفحه اصلی
      • بلاگ
        • ژنتیک
        • میکروبیولوژی
        • کشت سلول و بافت‌شناسی
        • علوم آزمایشگاهی
        • بیوتکنولوژی
      • داروینو پلاس
        • معرفی شخصیت و آزمایشگاه
        • خبرهای علمی و پزشکی
        • معرفی سایت و نرم افزار

      کلیه حقوق برای وبسایت داروینو محفوظ است.

      خوش آمدید!

      ورود به حساب کاربری خود در زیر

      رمز عبور را فراموش کرده اید؟ ثبت نام

      ایجاد حساب جدید!

      پر کردن فرم های زیر برای ثبت نام

      تمام زمینه ها مورد نیاز است. ورود

      رمز عبور خود را بازیابی کنید

      لطفا نام کاربری یا آدرس ایمیل خود را برای تنظیم مجدد رمز عبور خود وارد کنید.

      ورود