• آخرین
  • روند
  • همه
فلوسایتومتری

راهنمای جامع تکنیک فلوسایتومتری

اردیبهشت 11, 1402
توالی یابی به روش نیمه رسانا

توالی یابی به روش نیمه رسانا (Ion torrent)

فروردین 25, 1402
استخراج DNA

مروری بر انواع روشهای استخراج DNA

فروردین 5, 1402
توالی یابی SOLiD

توالی یابی SOLiD

اسفند 18, 1401
پایروسیکوئنسینگ

توالی یابی به روش پایروسیکوئنسینگ(Pyrosequencing)

بهمن 18, 1401
توالی یابی سنگر

توالی یابی سنگر (sanger) | نسل اول تعیین توالی DNA

بهمن 16, 1401
توالی یابی ماکسام گیلبرت

توالی یابی ماکسام گیلبرت | روش تجزیه شیمیایی یا شکست زنجیر

بهمن 1, 1401
انواع سندرم های ژنتیکی

بررسی انواع سندرم های ژنتیکی

اردیبهشت 9, 1402
تکنیک کریسپر

تکنیک کریسپر

فروردین 25, 1402
رومانوف

پیدا کردن اعضای خاندان رومانوف با بررسی STR های استخوان های خانواده سلطنتی

خرداد 9, 1402
استخراج DNA با پروتئیناز K

استخراج DNA با پروتئیناز K

فروردین 5, 1402
طراحی پرایمر

راهنمای جامع طراحی پرایمر

فروردین 25, 1402
تکنیک SDS-PAGE

تکنیک SDS-PAGE

اردیبهشت 15, 1401
روز جهانی DNA

روز جهانی DNA

اردیبهشت 5, 1401
استخراج DNA به روش Salting Out

استخراج DNA به روش Salting Out

فروردین 5, 1402
روز علوم آزمایشگاهی

روز علوم آزمایشگاهی؛ زاد روز حکیم اسماعیل جرجانی

فروردین 29, 1401
روز جهانی هموفیلی

روز جهانی هموفیلی

فروردین 27, 1401
  • وبسایت داروینو
  • درباره ما
  • تماس با ما
چهارشنبه, خرداد 17, 1402
  • ورود
  • ثبت نام
لوگوی وبلاگ داروینو
  • صفحه اصلی
  • بلاگ
    • همه
    • بیوانفورماتیک
    • بیوتکنولوژی
    • پزشکی و داروسازی
    • ژنتیک
    • علوم آزمایشگاهی
    • کشت سلول و بافت‌شناسی
    • میکروبیولوژی
    توالی یابی به روش نیمه رسانا

    توالی یابی به روش نیمه رسانا (Ion torrent)

    استخراج DNA

    مروری بر انواع روشهای استخراج DNA

    توالی یابی SOLiD

    توالی یابی SOLiD

    پایروسیکوئنسینگ

    توالی یابی به روش پایروسیکوئنسینگ(Pyrosequencing)

    توالی یابی سنگر

    توالی یابی سنگر (sanger) | نسل اول تعیین توالی DNA

    توالی یابی ماکسام گیلبرت

    توالی یابی ماکسام گیلبرت | روش تجزیه شیمیایی یا شکست زنجیر

    انواع سندرم های ژنتیکی

    بررسی انواع سندرم های ژنتیکی

    تکنیک کریسپر

    تکنیک کریسپر

    رومانوف

    پیدا کردن اعضای خاندان رومانوف با بررسی STR های استخوان های خانواده سلطنتی

    استخراج DNA با پروتئیناز K

    استخراج DNA با پروتئیناز K

    برچسب های پرطرفدار

    • داروینو پلاس
      • همه
      • بوم‌گردی
      • خبرهای علمی و پزشکی
      • معرفی دستگاه ها و تجهیزات آزمایشگاهی
      • معرفی سایت و نرم افزار
      • معرفی شخصیت و آزمایشگاه
      • معرفی شرکت های معتبر
      • معرفی فیلم و کتاب
      • مناسبت‌ها
      روز جهانی DNA

      روز جهانی DNA

      روز علوم آزمایشگاهی

      روز علوم آزمایشگاهی؛ زاد روز حکیم اسماعیل جرجانی

      روز جهانی هموفیلی

      روز جهانی هموفیلی

      دست نوشته های سرقت شده داروین

      بازگشت دست نوشته های سرقت شده داروین به کمبریج پس از 22 سال

      ذخایر ژنتیکی و زیستی

      ذخایر ژنتیکی و زیستی، گنجینه ی ملی ایران

      ژل داک

      دستگاه ژل داک یا مستندساز ژل و انواع آن

      نرم افزار Oligo 7

      َآنالیز و طراحی پرایمر با نرم افزار Oligo 7

      پیوند قلب خوک به انسان

      پیوند قلب خوک به انسان با استفاده از تکنیک کریسپر

      سانتریفوژ

      انواع سانتریفوژها و کاربرد آنها

      طراحی پرایمر با نرم افزار gene runner

      طراحی پرایمر با نرم افزار gene runner

      برچسب های پرطرفدار

      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      وبلاگ داروینو
      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      صفحه نخست بلاگ کشت سلول و بافت‌شناسی

      راهنمای جامع تکنیک فلوسایتومتری

      توسط مدیر سایت
      اردیبهشت 11, 1402
      در بلاگ, کشت سلول و بافت‌شناسی
      1 0
      0
      فلوسایتومتری

      تشخیص اجزای مختلف سلولی با استفاده از تکنیک فلوسایتومتری

      • تشخیص اجزای مختلف سلولی با استفاده از تکنیک فلوسایتومتری
          • آشنایی با تست فلوسایتومتری
          • کاربردهای فلوسایتومتری
          • کاربرد ایمونوفنوتایپ در تشخیص سرطان های خون و لنف
          • کاربرد ایمونوفنوتایپ در تشخیص ناباروری
          • کاربرد ایمونوفنوتایپ در بیماری های مربوط به نقص سیستم ایمنی بدن
          • نحوه انجام و تفسیر آزمایش فلوسایتومتری

      آشنایی با تست فلوسایتومتری

      سلول های موجود در مایعات مختلف بدن از جمله خون، ادرار، مایع مغزی نخاعی با تکنیک فلوسایتومتری مشخص می شوند. در حال حاضر از این روش برای تشخیص بسیاری از بیماری ها استفاده می شود. یک از مهم ترین کاربردهای تکنیک فلوسایتومتری، ایمونوفنوتایپ سلولی است که در این روش با استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال کنژوگه شده با فلوروکروم، مولکول های سطح و درون سلول لیبل می شوند.

      نمونه ها شامل سلول یا اجزایی است که در یک مایع به حالت سوسپانسیون در آمدند و به دستگاه فلوسایتومتر وارد می شوند. نمونه به صورتی که در حالت ایده آل در یک زمان مشخص جریان ایجاد شده یک سلول باشد از دستگاه عبور می کند در این زمان نور لیزر به سلول برخورد می کند و با پراکندگی نور تابیده شده به سلول ها ، اجزای آنها مشخص می شود.

      گاهی اوقات سلول ها با یک مارکر فلوئورسنت نشانه گذاری می شوند. در این موارد اول نور فلوئورسنت جذب و سپس در گروهی از طول موج ها منتشر می شود. فلوسایتومتری از این جهت روش خیلی خوبی است که ده ها هزار سلول می توانند به سرعت مورد بررسی قرار بگیرند و داده های جمع آوری شده با یک کامپیوتر پردازش می شوند.

      کاربردهای فلوسایتومتری

      فلوسایتومتری به صورت روتین در آزمایش های بالینی و تحقیقاتی مورد استفاده قرار می گیرد و از آن برای موارد زیر استفاده می شود:

      • تشخیص نوع سلول
      • شمارش سلول ها
      • تعیین ویژگی های سلولی و عملکرد آن ها
      • تشخیص میکروارگانیسم ها
      • تشخیص بیومارکر
      • تشخیص پروتئین ها و عملکرد آنها
      • تشخیص اختلالات سیستم لنفاوی و گردش خون
      • تشخیص ناباروری

      کاربرد ایمونوفنوتایپ در تشخیص سرطان های خون و لنف

      با استفاده از تکنیک ایمونوفنوتایپ حتی تعداد بسیار کم سلول های سرطانی قابل تشخیص است بنابراین روشی مناسب برای تشخیص سرطان در مراحل اولیه و پیشگیری از گسترش آن می باشد. بدلیل کم و زیاد شدن تعداد پلوییدی و تشخیص محتوای DNA غیرطبیعی در بیشتر سرطان ها، برای سنجش جرم DNA در سلول ها نیز از ایمونوفنوتایپ استفاده می شود.

      کاربرد ایمونوفنوتایپ در تشخیص ناباروری

      طبق مطالعات پژوهشگران ناباروری با ضعف سیستم ایمنی مرتبط است. گاهی اوقات با معاینات پزشکی علت ناباروری و یا سقط مکرر جنین قابل تشخیص نیست بنابراین تعیین میزان سلول های کشنده طبیعی(Natural Killer Cell) و زیر گروه های لنفوسیت ها با ایمونوفنوتایپ می تواند به تشخیص کمک کند.

      برای تشخیص ناباروری هایی که علت مشخصی ندارند، پنل آزمایش ناباروری فلوسایتومتری تحت عنوان Infertility Flow Cytometry Panel توصیه می شود که در آن سایتوکین های مهارکننده در رشد جنین بررسی می شود. این سایتوکین ها عبارتند از CD3+, CD4+, CD5+, CD8+, CD16+, CD19+, CD56+ Cytokine که می توانند مورد بررسی قرار بگیرند.

      کاربرد ایمونوفنوتایپ در بیماری های مربوط به نقص سیستم ایمنی بدن

      بسیاری از بیماری های مربوط به نقص سیستم ایمنی بدن با عملکرد گلبول های سفید مرتبط است. به عنوان مثال علت بیماری ایدز، کاهش لنفوسیت های +CD4 در خون است. برای درمان این بیماری از تست فلوسایتومتری برای بررسی تعداد لنفوسیت های +CD4 استفاده می شود.

      در واقع فلوسایتومتری یک روش و دستگاه فلوسایتومتر وسیله ای برای آنالیز داده های قابل اندازه گیری یک نمونه است. فلوسایتومترهای مدرن قادر به تجزیه و تحلیل هزاران ذره در ثانیه هستند و اگر به عنوان تعیین کننده ی نوع سلول پیکربندی شوند می توانند ذرات را با خواص اپتیکی مشخص با نرخ مشابه مقایسه کنند.

      فلوسیاتومتر شبیه به یک میکروسکوپ است، اما تفاوتش این است که  به جای تولید تصویری از سلول، فلوسایتومتری، تعیین ویژگی های مشخص شده ی نوری را بصورت خودکار با کیفیت بالا و بر اساس سلول به سلول ارائه می دهد.

      فلوسایتومتری

      نحوه انجام و تفسیر آزمایش فلوسایتومتری

      در روش فلوسایتومتری سلول‌ها یا با آنتی بادی‌های مونوکلونال متصل به فلورسنت و یا فلوروکروم های متصل شونده به اجزای سلولی رنگ آمیزی می شوند. این رنگ آمیزی شدن تحت تاثیر عوامل زیادی است مثل اینکه چقدر آنتی بادی اختصاصی است یا اینکه غلظت آنتی ژن روی سطح یا داخل سلول چقدر است و… بعد دستگاه باید بتواند نور لیزر یا فلوئورسنس پراکنده شده را از یک سلول تکی از بین همه ی سلول های دیگر ردیابی کند بنابراین تک تک رد شدن سلول ها از مقابل نور بسیار مهم است. سلول های هر نمونه ای را داخل یک مایع به حالت سوسپانسیون در می آورند که آن محیط ایزوتونیک و دارای Ph=3/7 است.

      سوال اینجاست که چگونه سلول ها تک تک رد شوند؟ غلظت سلولی اینجا بسیار مهم است و سلول ها باید غلظتی بین ۱۰ به توان ۵ تا ۱۰ به توان ۶ در هر میلی لیتر داشته باشند. حجم کلی نمونه هم بین ۱ تا ۲ میلی لیتر معمولا کافی است اما اگر بخواهیم سلول خاصی را در یک نمونه بررسی کنیم که غلظتش از سلول های دیگر موجود در آن نمونه خیلی کمتر است، ابتدا باید بخشی از آن سلول های بی ربط را حذف کنیم.

      دستگاه فلوسایتومتر، قطر سلول ها را هم اندازه می گیرد اما برای این کار محدودیت دارد و قطر سلول مورد نظر باید بین ۱ تا ۳۰ میکرون باشد. برای سلول هایی با قطر کمتر حساسیت ندارد و قطر بیشتر سلول ها هم که مجرای عبور سلول را می بندد.

      نمونه ی خون معمولا بهترین نمونه برای انجام آزمایش فلوسایتومتری است. چون اندازه ی پلاکت ها ۱ میکرون است و سلول های خونی هم ۶ تا ۱۲ میکرون قطر دارند. علاوه بر این نمونه ی خون خودش حاوی سلول های منفرد است که در پلاسمای خون معلق هستند. به عنوان مثال برای نمونه ی مغز استخوان می شود با پیپت کردن پشت سر هم سلول ها را به صورت سوسپانسیون سلول های منفرد درآورد. اما نمونه های تهیه شده از بافت های جامد یا لنفوئیدی باید اول اتصالات سلول به سلول و سلول به بستر را از دست بدهند و بعد بصورت سوسپانسیون دربیایند.

      نکته ی مهم در مورد فلوسایتومتری این است که تا زمان آنالیز نمونه خصوصیات و عملکرد سلول باید در حالت طبیعی و دست نخورده باقی بماند. گاهی لازم است سلول ها را به صورت زنده بررسی کرد تا خصوصیاتی مثل زنده بودن، توانایی فاگوسیتوز و… را بررسی کرد. برای همین این سلول ها باید در محیط فیزیولوژیک رقیق شوند و هرچه سریع تر هم مورد آزمایش قرار بگیرند.

      سلول های زنده به مقدار کمتری با آنتی بادی غیر اختصاصی متصل می شوند اما برای بعضی ویژگی های دیگر سلول همانند بیان آنتی ژن های اختصاصی سلول نیاز نیست که حتما سلول زنده باشد. در نظر داشته باشید که نباید تغییرات زیادی در ساختمان سلولی اتفاق افتاده باشد.

      کارآموزی آزمایشگاه

      برای آموزش فلوسایتومتری و  کاربرد آن در آزمایشگاه

      از طریق لینک دوره های آموزشی تخصصی آزمایشگاه می توانید اقدام نمایید.

       

      بیشتر بخوانید:

      • روش های شناسایی و تشخیص هویت سلول ها
      • Flow Cytometry An Overview – NCBI 
      برچسب ها: آنتی بادی مونوکلونالایمونوفنوتایپبیومارکرتشخیص هویت سلول هافلوسایتومتری
      پست قبلی

      تکنیک Long PCR و کاربرد آن در آزمایشگاه ژنتیک

      پست بعدی

      کشت مایع آمنیوتیک | شرایط نمونه گیری و روش کار

      مدیر سایت

      مدیر سایت

      پست بعدی
      مایع آمنیوتیک

      کشت مایع آمنیوتیک | شرایط نمونه گیری و روش کار

      دیدگاهتان را بنویسید لغو پاسخ

      نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

      وبلاگ داروینو

      کلیه حقوق برای وبسایت داروینو محفوظ است.

      دسترسی سریع

      • وبسایت داروینو
      • درباره ما
      • تماس با ما

      ما را دنبال کنید

      بدون نتیجه
      مشاهده همه نتیجه
      • وبسایت داروینو
      • صفحه اصلی
      • بلاگ
        • ژنتیک
        • میکروبیولوژی
        • کشت سلول و بافت‌شناسی
        • علوم آزمایشگاهی
        • بیوتکنولوژی
      • داروینو پلاس
        • معرفی شخصیت و آزمایشگاه
        • خبرهای علمی و پزشکی
        • معرفی سایت و نرم افزار

      کلیه حقوق برای وبسایت داروینو محفوظ است.

      خوش آمدید!

      ورود به حساب کاربری خود در زیر

      رمز عبور را فراموش کرده اید؟ ثبت نام

      ایجاد حساب جدید!

      پر کردن فرم های زیر برای ثبت نام

      تمام زمینه ها مورد نیاز است. ورود

      رمز عبور خود را بازیابی کنید

      لطفا نام کاربری یا آدرس ایمیل خود را برای تنظیم مجدد رمز عبور خود وارد کنید.

      ورود