✍ شرایط مورد نیاز برای کشت سلول در محیط آزمایشگاه  

کشت سلول فرآیندی است که طی آن سلول‌ها تحت شرایط کنترل شده و بیرون از محیط طبیعی شان رشد داده می‌شوند. شرایط کشت یاخته‌ای برای هر گونه از یاخته‌ها می‌تواند متفاوت باشد.

شرایط لازم و اساسی برای رشد سلول ها در محیط کشت

۱-محیط کشت و مواد افزودنی

۲-ظروف کشت

۳-محیط کار مناسب

۴-نوع بافتی که کشت داده می شود

محیط کشت و مواد افزودنی:

از زمانی که بافت از بیمار گرفته و کشت داده می شود نیاز به محیط ایزوتونیک دارد که حاوی محلول نمکی بافر فسفات PBS، محلول نمکی (Earle base) و محلول نمکی Hanks است. نکته مهم در این بخش این است که محلول های نمکی ذکر شده، محیط ایزوتونیک با قدرت بافری متفاوتی ایجاد می کنند و محیط ایزوتونیک مدت زمان محدودی تا زمان کشت از بافت نگهداری می کند.

ظروف کشت:

ظروف کشت شامل فلاسک ها، لوله ها و پیپت ها و ظروف پلاستیکی قابل اتوکلاوی بایستی استریل شوند و ظروف شیشه ای با حرارت ۲۵۰ درجه سانتی گراد به مدت ۲ ساعت در فور استریل می شوند و ظروف پلاستیکی قابل اتوکلاو شدن، در فشار ۱۵ pis به مدت ۱۵ الی ۲۰ دقیقه اتوکلاو می شوند.

محیط کار مناسب:

محیط اطراف کشت که شامل، سطح هوا و خود فردی که کار می کند است و هر آزمایشگاه موظف است که یک محیط کشت سلول مناسب از لحاظ مجزا بودن و استریل و به دور از گرد و غبار داشته باشد. با این حساب آزمایشگاه ها باید  هودهایی با جریان laminar  داشته باشند واین هود در جای مناسبی قرار بگیرد که رفت و آمد حداقل باشد. در هودهای laminar  از لامپ UV وجریان هوای فیلتر شده استفاده می کنند و حتما باید توجه بشود که سطح محلی که کار می کنیم با الکل ۷۰% کاملا ضدعفونی شده و از دستکش های استریل برای محافظت از آلودگی ها و عفونت ها در زمان انجام کار استفاده شود، یکی دیگر از مواردی که برای کاهش آلودگی گرد و غبار و استریل لوله ها استفاده می شود، شعله است.

یک نکته بسیار مهم در زمان کار با نمونه ها که باید در جهت کاهش آلودگی به آن توجه کنیم، اینکه همه نمونه ها بایستی به عنوان نمونه هایی از بیماری ها ی عفونی در نظر گرفته شوند.

آخرین مطلب در مورد نوع بافتی که کشت داده می شود، این است که نمونه های آماده شده که می تواند بافت و یا خون باشد، حتما باید در شرایط استریل باشند، به این صورت که با الکل ۷۰% یا ایزوپروپیل. الکل، محل نمونه گیری را ضدعفونی می کنند. نمونه های مورد استفاده شامل خون، مغز استخوان، کوریونیک ویلی و مایع آمنیوتیک هستند

انواع کشت سلولی مایع آمنیوتیک

کشت مایع آمنیوتیک – شرایط نمونه گیری و روش کار

سیتوژنتیک – تکنیک کاریوتایپ- کشت نمونه خون محیطی